ELISA試劑盒血清樣本要怎樣保留
ELISA試劑盒的血清樣本保留需要遵循?采集分離→分裝→按期限條件保存?的標準化流程,具體操作步驟和要求如下:
一、采集與分離流程
使用?無熱源、無內毒素?的無菌試管或離心管采集血液標本,室溫放置10分鐘~2小時,或4℃條件下過夜,讓血液自然凝固使血清充分析出;建議傾斜容器擴大液面橫截面,提升血清析出量。
4℃條件下?1000~3000g離心20分鐘?,仔細收集上清得到血清;若保存過程中出現沉淀或絮狀物,需要再次離心去除雜質。本生BUNSEN試劑盒
二、分裝要求
分離后的血清建議按照單次檢測用量分裝到本生BUNSEN無菌離心管中,避免后續(xù)反復凍融破壞樣本中的蛋白質,導致檢測結果假陰性。操作需在潔凈生物安全臺進行,全程佩戴無菌手套,避免細菌污染,否則菌體含有的內源性HRP會引發(fā)檢測假陽性。
三、保存條件與期限
保存時長與溫度直接相關,需根據檢測時間選擇對應條件:
1周內檢測?:可放置在?2~8℃冷藏保存?,無菌分離的血清可穩(wěn)定保存約1周。
1個月內檢測?:分裝后置于?-20℃冷凍保存?即可。
長期保存(超過1個月)?:需置于?-70℃(或-80℃)超低溫冰箱?保存,可穩(wěn)定保存6個月,部分文獻顯示活性合格的樣本最長可保存5年。
四、關鍵注意事項
絕對禁止反復凍融:凍融產生的機械剪切力會破壞蛋白,必須分裝后凍存,每次僅取出一份使用。
必須避免溶血:紅細胞破裂會釋放過氧化物酶活性物質,在HRP標記的ELISA體系中會引發(fā)非特異性顯色,導致結果不準;若血清呈粉紅色提示溶血,需重新采集。
樣本融化:使用前需平衡至室溫,禁止用水浴鍋快速融化,融化后需輕柔混勻避免氣泡,禁止劇烈振蕩。
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