利用IITC MRBP鼠尾血壓測量儀探究萊菔子水煎液對大鼠的降壓作用

山東中醫藥大學實驗中心高世杰團隊在《時珍國醫國藥》2022年第33卷第4期發表研究，采用糞便代謝組學方法考察萊菔子水煎液對自發性高血壓大鼠的降血壓作用及糞便代謝物影響，分析相關代謝通路，為萊菔子降壓機制提供實驗依據。

摘要

目的：探討萊菔子水煎液對自發性高血壓大鼠（SHR）的降壓作用及其對SHR糞便代謝物的影響，分析特征代謝物可能涉及的代謝通路，為探索萊菔子降壓機制提供實驗依據。

方法：選用8周齡雄性SHR，隨機分為模型組和萊菔子水煎液組，以8周齡雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠為對照，灌胃6周后采集大鼠糞便，采用液相色譜-質譜法采集糞便代謝物數據，利用SIMCA-P14.0、MetaboAnalyst4.0等軟件進行數據分析。

結果：萊菔子水煎液對SHR有明顯降壓作用（P<0.05），并調節糞便中亞油酸、尿香草苦杏仁酸、鵝去氧膽酸等代謝物水平，相關代謝通路包括亞油酸代謝通路、苯丙氨酸代謝通路、卟啉與葉綠素代謝通路、花生四烯酸代謝通路等。

結論：萊菔子水煎液具有確切的降壓作用，可改變SHR內源性代謝物。

材料與儀器

實驗動物

8周齡雄性SHR大鼠14只，體質量（200±20）g；8周齡雄性SPF級WKY大鼠7只，體質量（200±20）g

實驗藥材

萊菔子，經鑒定為十字花科植物蘿卜的干燥成熟種子

實驗儀器

屹立高速粉碎機、旋轉蒸發器（YRE-501型）、IITC MRBP 10通道大小鼠尾血壓測量儀、冷凍離心機、53050型真空濃縮儀、超聲波清洗器、UltiMate 3000超高效液相色譜儀

IITC MRBP鼠尾血壓測量儀

實驗試劑

乙腈、甲醇（純度≥99.9%）、甲酸（LC-MS級）、2-氯苯丙氨酸（純度≥98.5%）、甲酸銨（純度≥99.9%）、超純水

實驗過程

動物分組：14只SHR適應性飼養1周后，隨機分為萊菔子水煎液組和模型組，每組7只；7只WKY大鼠作為對照組。

萊菔子水煎液制備：萊菔子粉碎至50目，稱取180g加蒸餾水浸泡30min，微沸煎煮30min，過濾后濾渣再次煎煮，合并濾液旋蒸濃縮定容至200ml。

給藥干預：萊菔子水煎液組按9g·kg?1·d?1生藥量灌胃，模型組與對照組給予等體積蒸餾水，連續給藥6周。

血壓測量：采用IITC MRBP 10通道大小鼠尾血壓測量儀，每周測量大鼠尾動脈血壓1次，連續6周，每次測量3次取平均值。

樣品制備：給藥6周后采集新鮮糞便，-80℃保存；糞便樣本加2-氯苯丙氨酸甲醇溶液研磨、超聲、離心，取上清過濾后用LC-MS檢測。

檢測條件：采用超高效液相色譜儀配合Q Exactive質譜儀，正負離子電離模式，設置對應色譜梯度與質譜參數進行檢測。

數據處理：原始數據經格式轉換、峰識別等處理后，進行PCA、OPLS-DA多元統計分析，篩選VIP>1.0的潛在差異離子，結合數據庫鑒定差異代謝物，富集分析相關代謝通路。

實驗結論

1.萊菔子水煎液對自發性高血壓大鼠具有明顯降血壓作用（P<0.05），干預6周后降壓效果明確。

2.萊菔子水煎液可調節SHR糞便中17種差異代謝物水平，包括亞油酸、尿香草苦杏仁酸、鵝去氧膽酸等。

3.萊菔子降壓作用與6條關鍵代謝通路密切相關，分別為亞油酸代謝、苯丙氨酸代謝、卟啉與葉綠素代謝、花生四烯酸代謝、賴氨酸的降解、嘧啶的代謝。

4.萊菔子可能通過調節脂質代謝、能量代謝及血管舒張相關代謝物，發揮降低血壓的藥理效應。

參考文獻

1.趙建敏.萊菔子治療高血壓病70例臨床觀察[J].河北中醫藥學報,1999,14(3):13.

2.李鐵云,李天國,張國俠,等.萊菔子水溶性生物堿對自發高血壓大鼠降壓作用的實驗研究[J].世界中西醫結合雜志,2007,2(1):25.