暗箱式紫外分析儀的操作方法主要包括設(shè)備準(zhǔn)備、樣品觀察與檢測、圖像采集及安全關(guān)閉四個核心步驟,整個過程需在注意紫外線防護(hù)的前提下進(jìn)行。
1、設(shè)備準(zhǔn)備與開機(jī)
使用前檢查電源是否穩(wěn)定,并確保儀器放置在平穩(wěn)、無振動的工作臺上。打開儀器后蓋,確認(rèn)紫外燈管(通常為254nm/365nm雙波長)安裝到位,連接電源后預(yù)熱5分鐘。操作人員應(yīng)佩戴防紫外護(hù)目鏡,避免直視光源,防止紫外線對眼睛造成損傷。根據(jù)樣品類型選擇透射或反射觀察模式,并調(diào)節(jié)亮度旋鈕至適中強(qiáng)度。
2、樣品放置與觀察
打開送樣門,將電泳凝膠、薄層板或紙層分析樣品平放在儀器中央的紫外透射玻璃上,關(guān)閉暗箱門以隔絕外界光線。開啟“透射”或“反射紫外燈”開關(guān),通過觀察窗口查看樣品發(fā)出的熒光。可調(diào)節(jié)紫外燈架的高度與角度,使樣品熒光顯示最清晰明亮。通常反射紫外燈離樣品越近,熒光越強(qiáng)。
3、波長選擇與圖像采集
根據(jù)檢測目標(biāo)選擇合適的激發(fā)波長:
254nm短波紫外:適用于DNA/RNA凝膠電泳條帶觀察、芳香族化合物及蛋白質(zhì)檢測;
365nm長波紫外:用于維生素、激素、黃曲霉素等熒光物質(zhì)的檢測,對樣品損傷較小。
如需拍攝照片,在相機(jī)前加裝近攝接圈和PCR濾色鏡,先開啟白熾燈照明調(diào)整焦距,再關(guān)閉白熾燈并開啟紫外燈進(jìn)行曝光拍攝,需根據(jù)樣品特性設(shè)定合適曝光時間。
4、檢測結(jié)束與設(shè)備維護(hù)
檢測完成后,先關(guān)閉紫外燈電源,再切斷總電源。取出樣品,用干凈柔軟的紗布輕輕擦拭紫外濾色玻璃表面,保持干燥清潔。定期檢查燈管亮度和濾光片狀態(tài),若發(fā)現(xiàn)劃痕或污染應(yīng)及時處理,確保儀器性能穩(wěn)定。
安全提示:操作時嚴(yán)禁裸眼直視紫外光源,建議佩戴專用防護(hù)眼鏡;避免金屬物體刮擦紫外濾色片,防止損壞;非操作人員應(yīng)遠(yuǎn)離正在運行的設(shè)備,以防紫外線暴露風(fēng)險。